Fluoreszenz in situ Hybridisierung (FISH)

Fluoreszenz in situ Hybridisierung (FISH)

Fluoreszenz ist die Abstrahlung von Licht gleicher oder größerer Wellenlänge nach Belichtung. Die Fluoreszenz-in-situ-Hybridisierung ist eine molekularzytogenetische Methode zum Nachweis von chromosomalen Veränderungen sowie zur Lokalisation und zum Nachweis der Kopienzahl eines Gens (Chromosoms). Zunächst werden Fluoreszenz-markierte Nucleotide in spezifische DNA-Stränge (DNA-Sonden) eingebaut. Fertige Sonden werden von verschiedenen Diagnostika-Anbietern vertrieben. Nach anschließender Hybridisierung fixierter Interphasezellen oder Metaphase-Chromosomen mit diesen Sonden werden die gebundenen DNA-Moleküle unter dem UV-Mikroskop sichtbar gemacht und ausgewertet. Die Zahl und Lokalisation der erkannten fluoreszierenden Bereiche stimmt mit der Anzahl der Genkopien (normalerweise zwei) und deren chromosomaler Lokalisation überein.

Beispiele der FISH-Diagnostik

FISH in der Pränataldiagnostik (FISH-Schnelltest AneuVysion) Mittels des sogenannten AneuVysion Schnelltests können innerhalb kurzer Zeit Fruchtwasser-Zellen auf die häufigsten chromosomalen Fehlverteilungen untersucht werden. In zwei Ansätzen werden Markierungssonden für die Chromosomen X, Y und 18 sowie für die Chromosomen 13 und 21 verwendet.


FISH auf Chromosomen 13 (grün) und 21 (rot)

FISH auf Chromosomen X (grün) Y (rot) und 18 (aqua)

FISH in der Hämatologie / Onkologie

Chronic Myelogenous Leukemia (CML)
CEP 8 SpectrumOrange Chromosome Enumeration DNA Probe Kit
LSI BCR/ABL Dual Color Translocation Probe (BCR SpectrumGreen/ABL SpectrumOrange

Acute Myelogenous Leukemia (AML)
CEP 8 SpectrumOrange Chromosome Enumeration DNA Probe
LSI MLL Dual Color Rearrangement Probe 11q23 (5′ MLL SpectrumGreen/3′ MLL SpectrumOrange)
LSI CSF1R (5q33-q34) SpectrumOrange/ D5S721, D5S23 (5p15.2) SpectrumGreen Control (dual color probe)
LSI D7S486 (7q31) SpectrumOrange/CEP 7 SpectrumGreen Control (dual color probe)
LSI D20S108 (20q12) SpectrumOrange Probe
LSI EGR-1 (5q31) SpectrumOrange/D5S721, D5S23 (5p15.2) SpectrumGreen Control (dual color probe)
LSI D7S522 (7q31) SpectrumOrange/CEP 7 SpectrumGreen Control (dual color probe)
LSI BCR/ABL Dual Color Single Fusion Translocation Probe (BCR SpectrumGreen/ABL SpectrumOrange)

Acute Lymphocytic Leukemia (ALL) 
LSI MLL Dual Color Rearrangement Probe 11q23 (5′ MLL SpectrumGreen/3′ MLL SpectrumOrange)
LSI TEL/AML1 Dual color rearangement probe.
LSI IGH/MYC, CEP 8 Tri-color, Dual Translocation Probe
LSI MYC Dual Color, Dual Fusion Break Apart Rearrangement Probe
LSI BCR/ABL Dual Color Single Fusion Translocation Probe (BCR SpectrumGreen/ABL SpectrumOrange)

Chronic Lymphocytic Leukemia (CLL)
LSI ATM (11q22.3) Probe
CEP 12 SpectrumOrange Chromosome Enumeration
LSI® 13 (RB-1 locus, 13q14) SpectrumOrange
LSI D13S319 (13q14.3) SpectrumOrange
LSI p53 (17p13.1) SpectrumOrange
IGH Dual Color Break Apart Rearrangement Probe t(14q32) and its variants

Myelodysplastic Syndrome (MDS) 
LSI CSF1R (5q33-q34) SpectrumOrange/ D5S721, D5S23 (5p15.2) SpectrumGreen Control (dual color probe)
LSI EGR-1 (5q31) SpectrumOrange/D5S721, D5S23 (5p15.2) SpectrumGreen Control (dual color probe)
LSI D7S522 (7q31) SpectrumOrange/CEP 7 SpectrumGreen Control (dual color probe)
CEP 8 SpectrumOrange Chromosome Enumeration DNA Probe
LSI® 13 (RB-1 locus, 13q14) SpectrumOrange
LSI D20S108 (20q12) SpectrumOrange
LSI BCR/ABL Dual Color Single Fusion Translocation Probe (BCR SpectrumGreen/ABL SpectrumOrange)

Multiple Myeloma
LSI ATM (11q22.3) Probe
LSI® 13 (RB-1 locus, 13q14) SpectrumOrange
LSI D13S319 (13q14.3) SpectrumOrange
LSI p53 (17p13.1) SpectrumOrange
IGH Dual Color Break Apart Rearrangement Probe t(14q32) and its variants

FISH zur Diagnostik chromosomaler Mikrodeletionen
LSI Prader-Willi/Angelman Region Probe [SNRPN SpectrumOrange/CEP 15 (D15Z1) SpectrumGreen/PML SpectrumOrange]
LSI DiGeorge/VCFS Region Probe [TUPLE 1 SpectrumOrange/ARSA (22q13.3) SpectrumGreen Control Probe]
LSI Cri-du-Chat Region Probe [EGR-1 (5q31) SpectrumOrange D5S721, D5S23 (5p15.2) SpectrumGreen]
LSI Williams Syndrome (Elastin Gene) Region Probe [SpectrumOrange/D7S486, D7S522 SpectrumGreen Control Probe]
LSI Steroid Sulfatase (STS) Probe [STS SpectrumOrange/CEP X SpectrumGreen Control Probe]
LSI Kallmann’s (KAL) Region Probe [KAL SpectrumOrange/CEP X SpectrumGreen Control Probe]
LSI LIS1 Miller-Dieker Probe [LIS1 SpectrumOrange/RARA SpectrumGreen Control Probe]
LSI SMS Smith-Magenis Probe [SMS Region SpectrumOrange/RARA SpectrumGreen Control Probe]
LSI Wolf-Hirschhorn (WHS) Probe [WHS Region SpectrumOrange/CEP 4 SpectrumGreen Control Probe]
LSI 1p36 Microdeletion Region Probe